Gammelt gresk helligdom nær Pompeii gir 2500 år gammelt honningfunn

Forskere ved University of Oxford har endelig løst et 70 år gammelt arkeologisk mysterium ved å bekrefte at en klebrig oransjebrun rest funnet i bronsekrukker ved et gammelt gresk helligdom nær Pompeii faktisk er 2500 år gammel honning, noe som avslutter tiår med vitenskapelig debatt om stoffets sanne identitet. Ved hjelp av avanserte massespektrometri-teknikker oppdaget teamet sukkerarter, organiske syrer og gelé royal-proteiner som tidligere analyser hadde oversett, noe som gir det første biomolekylære beviset på at krukkene fra helligdommen i Paestum, Italia, fra det 6. århundre f.Kr. inneholdt honningkake-ofringer til gudene.

Bronsekrukker fra utgravningen i Paestum

Det underjordiske helligdommen inneholdt åtte praktfulle bronsekar som representerte en betydelig formue da de ble plassert som ofringer mellom 530-510 f.Kr. Seks av disse skattene var hydriai (vannkrukker med tre håndtak) og to var amforaer (kar med to håndtak), alle laget av svært dyktige håndverkere ved bruk av teknologisk avanserte teknikker fra den tiden. Karene viste ekstraordinære kunstneriske detaljer, der noen hydriai hadde håndtak formet som hender eller dekorert med kvinnehoder, mens ett spesielt slående eksempel hadde et vertikalt håndtak formet som en løve.sights.seindal

Alle de åtte bronsekrukkene var fylt med det mystiske klebrige stoffet og forseglet nøye med voks, og innholdet forble mykt selv da forseglingene ble brutt under utgravningen i 1954. Ved siden av disse bronsemesterverkene oppdaget arkeologer en athensk keramisk amfora som bevisst var reparert med blystykker etter at bunnen knuste, noe som tyder på at fartøyets malte scener hadde større betydning enn dets bruksverdi. Helligdommen ble tilgjengelig ved å bryte gjennom takstein av terrakotta siden ingen døråpning eksisterte, og i dag er disse dyrebare gjenstandene utstilt i det arkeologiske museet i Paestum mens det underjordiske kammeret forblir tomt.miragenews+1

Analyseteknikker med massespektrometri

Identifiseringen av gelé royal-proteiner i eldgammel honning krevde banebrytende massespektrometri-teknologier som flytter grensene for molekylære deteksjonsmuligheter. Orbitrap-massespektrometri viste seg å være spesielt avgjørende for denne analysen, og oppnådde ultrahøy masseoppløsning som oversteg 100 000 ved m/z 35 000, noe som muliggjorde presis identifisering av nedbrutte proteinfragmenter som overlevde 2500 års aldring. Denne eksepsjonelle oppløsningen viste seg å være avgjørende for å skille eldgammel biomolekylær signatur fra miljøforurensninger og interferens fra den arkeologiske matrisen.chromatographyonline

Komplementære analytiske tilnærminger forbedret deteksjonsfølsomheten for spor av organiske forbindelser bevart i bronsekarene. Multi-reflekterende flytid-massespektrometri (MR-TOF) ga raske analysekapasiteter med høy gjennomstrømning ved å utvide ionenes flyvebaner gjennom flere refleksjonstrinn, noe som oppnådde overlegen massekvalitet uten å kreve massive instrumentstørrelser. Integreringen av tandem-massespektrometri (MS/MS)-teknikker tillot forskere å fragmentere mistenkte proteinioner og analysere de resulterende molekylære delene, noe som ga definitiv strukturell bekreftelse av gelé royal-komponenter gjennom sekvensiell fragmenteringsanalyse. Disse avanserte metodene, kombinert med maskinlæringsalgoritmer for mønstergjenkjenning, gjorde det mulig for forskere å trygt identifisere biomolekylære markører som tidligere analytiske teknikker ikke hadde klart å oppdage i tiårene etter helligdommens første utgravning.scispace+1

Deteksjon av gelé royal-protein

Avanserte analytiske metoder har muliggjort presis deteksjon og kvantifisering av gelé royal-proteiner, der Major Royal Jelly Protein 1 (MRJP1) fungerer som den mest kritiske biomarkøren for autentisitet. Forskere har utviklet teknikker for ultra-ytelses væskekromatografi-tandem-massespektrometri (UPLC-MS/MS) som oppnår eksepsjonell nøyaktighet, med utbytter fra 85,33 til 95,80 % og presisjonsnivåer under 4,97 % RSD. Fersk gelé royal inneholder vanligvis MRJP1-konsentrasjoner mellom 41,96-55,01 mg/g, og avvik fra disse nivåene indikerer ofte forfalskning eller dårlig kvalitet.pubs.acs+1

Flere deteksjonstilnærminger har dukket opp for å evaluere autentisitet og friskhet hos gelé royal:

• Enzymkoblet immunosorbent-analyse (ELISA) ved bruk av svært spesifikke anti-MRJP1-antistoffer som reagerer utelukkende med MRJP1, og unngår kryssreaktivitet med andre gelé royal-proteinerbohrium
• Kolloidale gull-immunkromatografiske strimler som gir rask felttesting med deteksjonsgrenser så lave som 2 μg/mLpmc.ncbi.nlm.nih
• Signaturpeptidanalyse ved bruk av stabile isotopmerkede interne standarder for presis kvantifiseringpubmed.ncbi.nlm.nih+1

Disse proteindeteksjonsmetodene har vist seg uvurderlige for å overvåke nedbrytning av gelé royal under lagring, der MRJP1-innholdet synker med opptil 73,1 % etter 49 dager ved forhøyede temperaturer. Teknikkene identifiserer også vellykket forfalskning av honning, ved å oppdage MRJP1-konsentrasjoner på bare 0,02-0,4 mg/g i sterkt fortynnede prøver sammenlignet med 1,32 mg/g i rene honningprodukter.bohrium+1

Honning i den antikke verden

Arkeologiske funn har avslørt at honning spilte en sentral rolle i eldgamle sivilisasjoner langt utover middelhavsverdenen, med de eldste kjente honningprøvene som dateres 5500 år tilbake til bronsealderens Georgia. Under byggingen av oljerørledningen Baku-Tbilisi-Ceyhan i 2003 avdekket arkeologer keramiske kar i en georgisk adelskvinnes grav som inneholdt tre distinkte varianter av eldgammel honning – engblomst, bær og lind – alle bemerkelsesverdig bevart til tross for sin ekstraordinære alder. Dette funnet dateres omtrent 2500 år før den berømte egyptiske honningen fra kong Tutankhamons grav, noe som etablerer Georgia som potensielt fødestedet for både vinproduksjon og birøkt.tastingtable+2

Bevis på honningens betydning strekker seg enda lenger inn i forhistorien, med hulemalerier i Araña-hulene i Valencia, Spania, som dokumenterer honninginnsamlingspraksis fra 8000 år siden. Eldgamle sivilisasjoner brukte konsekvent honning til både åndelige og praktiske formål, ved å plassere forseglede krukker i gravkamre for å gi næring til den avdøde på deres reise i etterlivet, samtidig som de utnyttet dens antimikrobielle egenskaper for konservering og medisin. Det georgiske gravstedet speiler egyptisk praksis bemerkelsesverdig, med honningherdede bær som beholder sin røde farge og søte duft etter årtusener, noe som demonstrerer sofistikert forståelse av honningens konserverende egenskaper som tillot disse eldgamle kulturene å skape gjenstander som forblir intakte i dag.ancient-origins+2