Forngrískur helgistaður nálægt Pompeii leiðir í ljós 2500 ára gamalt hunang

Rannsakendur við Háskólann í Oxford hafa loksins leyst 70 ára gamla fornleifafræðilega ráðgátu með því að staðfesta að klístruð appelsínubrún leifar sem fundust í bronskrukkum við fornan grískan helgistað nálægt Pompeii séu í raun 2.500 ára gamalt hunang, sem lýkur áratuga vísindalegri umræðu um sanna auðkenni efnisins. Með því að nota háþróaða massagreiningartækni greindi teymið sykur, lífrænar sýrur og drónadrottningarprótein sem fyrri greiningar höfðu yfirsést, sem veitir fyrstu lífsameindafræðilegu sönnunina fyrir því að krukkurnar frá helgistaðnum í Paestum á Ítalíu frá 6. öld f.Kr. innihéldu hunangskökufórnir til guðanna.

Bronskrukkur úr uppgreftrinum í Paestum

Neðanjarðarhelgistaðurinn innihélt átta stórkostleg bronsílát sem táknuðu veruleg auðæfi þegar þau voru sett sem fórnir á árunum 530-510 f.Kr. Sex af þessum gersemum voru hydriai (vatnskrukkur með þremur handföngum) og tvær voru amphorae (ílát með tveimur handföngum), öll smíðuð af mjög hæfum handverksmönnum með tæknilega háþróaðri tækni þess tíma. Ílátin sýndu óvenjuleg listræn smáatriði, þar sem sum hydriai voru með handföng í laginu eins og hendur eða skreytt kvenmannshausum, á meðan eitt sérstaklega áberandi dæmi bar lóðrétt handfang smíðað í formi ljóns.sights.seindal

Öll átta bronskrukkurnar voru fylltar með dularfulla klístraða efninu og vandlega innsiglaðar með vaxi, þar sem innihaldið hélst mjúkt jafnvel þegar innsiglin voru brotin við uppgröftinn árið 1954. Samhliða þessum bronsmeistaraverkum fundu fornleifafræðingar athenska keramik-amphoru sem hafði verið vísvitandi lagfærð með blýstykkjum eftir að botninn brotnaði, sem bendir til þess að máluðu senurnar á ílátinu hafi haft meiri þýðingu en nytjagildi þess. Aðgangur var að helgistaðnum með því að brjóta í gegnum terrakotta-þakflísar þar sem engar dyr voru til staðar, og í dag eru þessir dýrmætu gripir til sýnis á Fornleifasafninu í Paestum á meðan neðanjarðarhólfið er enn tómt.miragenews+1

Massagreiningartækni

Auðkenning á drónadrottningarpróteinum í fornu hunangi krafðist nýjustu massagreiningartækni sem ýtir við mörkum getu sameindagreiningar. Orbitrap-massagreining reyndist sérstaklega mikilvæg fyrir þessa greiningu og náði ofur-hárri massaupplausn sem fór yfir 100.000 við m/z 35.000, sem gerði kleift að bera kennsl á niðurbrotin próteinbrot sem lifðu af 2.500 ára öldrun. Þessi óvenjulega upplausn reyndist nauðsynleg til að greina forna lífsameindafræðilega undirskrift frá umhverfismengun og truflunum frá fornleifafræðilegum fylkisþáttum.chromatographyonline

Viðbótargreiningaraðferðir juku næmi fyrir greiningu á snefilmagni lífrænna efnasambanda sem varðveittust í bronsílátunum. Multi-reflecting time-of-flight (MR-TOF) massagreining veitti hraðvirka greiningargetu með mikilli afköstum með því að lengja flugleiðir jóna í gegnum mörg endurkaststig, sem náði yfirburða massanákvæmni án þess að krefjast gríðarstórra tækja. Samþætting tandem-massagreiningar (MS/MS) aðferða gerði rannsakendum kleift að sundra grunuðum próteinjónum og greina sameindabrotin sem mynduðust, sem veitti endanlega uppbyggingarstaðfestingu á drónadrottningarhlutum með raðbundinni sundrunargreiningu. Þessar háþróuðu aðferðir, ásamt vélrænum reikniritum fyrir mynsturgreiningu, gerðu vísindamönnum kleift að bera kennsl á lífsameindafræðileg merki sem fyrri greiningartækni hafði ekki tekist að greina á áratugunum eftir upphaflegan uppgröft helgistaðarins.scispace+1

Greining á drónadrottningarpróteinum

Háþróaðar greiningaraðferðir hafa gert kleift að greina og mæla nákvæmlega drónadrottningarprótein, þar sem Major Royal Jelly Protein 1 (MRJP1) þjónar sem mikilvægasta lífmerkið fyrir áreiðanleikamat. Vísindamenn hafa þróað ofurafkastamikla vökvaskiljun-tandem-massagreiningu (UPLC-MS/MS) sem nær framúrskarandi nákvæmni, með endurheimt á bilinu 85,33 til 95,80% og nákvæmni undir 4,97% RSD. Ferskt drónadrottningarefni inniheldur venjulega MRJP1 styrk á bilinu 41,96-55,01 mg/g, og frávik frá þessum gildum benda oft til fölsunar eða lélegra gæða.pubs.acs+1

Margvíslegar greiningaraðferðir hafa komið fram til að meta áreiðanleika og ferskleika drónadrottningarefnis:

• Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) sem notar mjög sértæk anti-MRJP1 mótefni sem hvarfast eingöngu við MRJP1, og forðast krosshvarf við önnur drónadrottningarpróteinbohrium
• Colloidal gold immunochromatographic strips sem veita hraðvirka vettvangsprófun með greiningarmörkum allt að 2 μg/mLpmc.ncbi.nlm.nih
• Signature peptide analysis sem notar stöðug samsætu-merkt innri viðmið fyrir nákvæma mælingupubmed.ncbi.nlm.nih+1

Þessar próteingreiningaraðferðir hafa reynst ómetanlegar við eftirlit með niðurbroti drónadrottningarefnis við geymslu, þar sem MRJP1-innihald minnkar um allt að 73,1% eftir 49 daga við hækkað hitastig. Aðferðirnar greina einnig með góðum árangri fölsun á hunangi og greina MRJP1-styrk sem er aðeins 0,02-0,4 mg/g í mjög þynntum sýnum samanborið við 1,32 mg/g í hreinum hunangsvörum.bohrium+1

Hunang í hinum forna heimi

Fornleifauppgötvanir hafa leitt í ljós að hunang gegndi lykilhlutverki í fornum siðmenningum langt út fyrir Miðjarðarhafið, þar sem elstu þekktu hunangssýnin eru 5.500 ára gömul frá bronsöld í Georgíu. Við lagningu Baku-Tbilisi-Ceyhan olíuleiðslunnar árið 2003 fundu fornleifafræðingar keramikílát í gröf georgískrar aðalskonu sem innihéldu þrjár mismunandi tegundir af fornu hunangi — engjablóma-, berja- og lindihunang — sem öll varðveittust ótrúlega vel þrátt fyrir óvenjulegan aldur. Þessi uppgötvun er um 2.500 árum eldri en hið fræga egypska hunang úr gröf Tútankamons konungs, sem gerir Georgíu hugsanlega að fæðingarstað bæði vínframleiðslu og býflugnaræktar.tastingtable+2

Sannanir fyrir mikilvægi hunangs ná enn lengra aftur í forsöguna, þar sem hellamálverk í Araña-hellunum í Valencia á Spáni skrásetja hunangssöfnun frá því fyrir 8.000 árum. Fornar siðmenningar notuðu hunang stöðugt í bæði andlegum og hagnýtum tilgangi, settu innsiglaðar krukkur í grafhýsi til að næra hina látnu á ferð þeirra í framlífinu á meðan þau nýttu örverueyðandi eiginleika þess til varðveislu og lækninga. Georgíski grafstaðurinn endurspeglar egypska siði á ótrúlegan hátt, þar sem hunangsgeymd ber halda rauðum lit sínum og sætum ilm eftir árþúsundir, sem sýnir háþróaðan skilning á varðveislueiginleikum hunangs sem gerði þessum fornu menningarheimum kleift að búa til gripi sem haldast ósnortnir í dag.ancient-origins+2